主要成分與含量
試 劑 | 數(shù) 量 |
抗原包被板 | 1塊 |
標(biāo)記羊抗犬IgG | 0.5ml |
質(zhì)控陽(yáng)性血清 | 1瓶 |
質(zhì)控陰性血清 | 1瓶 |
樣品稀釋液 | 30ml |
酶標(biāo)抗體稀釋液 | 20ml |
洗滌液（W）（20×） | 20ml |
底物A、B液 | 各7ml |
終止液（S） | 7ml |
作用與用途
用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，檢測(cè)犬血清中的抗狂犬病毒IgG抗體。
用法與判定
1 需要自備的材料
1.1 去離子水或生理鹽水
1.2 可調(diào)移液器
1.3 1000ml的量筒
1.4 酶標(biāo)儀
1.5 37℃溫箱
2 預(yù)備步驟
2.1 血清滅活 將待檢樣品預(yù)先在56℃水浴中30分鐘進(jìn)行熱滅活處理。
2.2 溫度平衡 實(shí)驗(yàn)前將試劑盒從2～8℃冰箱取出，置室溫平衡30分鐘以上。
2.3 版面布置 做好質(zhì)控陽(yáng)性、質(zhì)控陰性血清和待檢樣品的版面布置記錄。
2.4 質(zhì)控陽(yáng)性血清、質(zhì)控陰性血清的稀釋
用0.5ml樣品稀釋液復(fù)溶質(zhì)控陽(yáng)性血清和質(zhì)控陰性血清，并作10倍系列稀釋至1:100。
2.5 待檢血清稀釋 將待檢血清10倍系列稀釋至1:100。
3 檢測(cè)步驟
3.1 加樣 將1:100稀釋的質(zhì)控陽(yáng)性血清、質(zhì)控陰性血清和待檢樣品按照版面布置加入板孔內(nèi)，100μl/孔，均作2孔重復(fù)。
3.2 孵育 將酶標(biāo)板置于37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，孵育30分鐘。
3.3 洗板 用純化水將濃縮洗滌液進(jìn)行20倍稀釋備用，棄掉板孔內(nèi)液體，加洗滌液200μl/孔，洗滌5次，甩干。
3.4 加酶標(biāo)抗體 用酶標(biāo)抗體稀釋液按照1：100稀釋酶標(biāo)抗體，100μl/孔。
3.5 孵育 將酶標(biāo)板置于37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，孵育60分鐘。
3.6 洗板 棄掉孔內(nèi)液體，加洗滌液200μl/孔，洗滌5次，甩干。
3.7 顯色 底物A、B液等體積混合，每孔加100ul。
3.8 孵育 將酶標(biāo)板置于37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，避光孵育20min。
3.9 終止 每孔加終止液50μl，5分鐘內(nèi)測(cè)定結(jié)果。
3.10 檢測(cè) 用酶標(biāo)儀測(cè)定并記錄各孔在450nm波長(zhǎng)處的吸光度（OD450nm）值。
4 結(jié)果判定
4.1 測(cè)有效性 當(dāng)質(zhì)控陽(yáng)性血清OD450nm值≥0.6，質(zhì)控陰性血清OD450nm值≤0.1，試驗(yàn)有效。
4.2 檢測(cè)結(jié)果判定 待檢樣品OD450nm值≥質(zhì)控陽(yáng)性血清OD450nm值，認(rèn)為待檢樣品血清抗體達(dá)到保護(hù)水平（0.5IU/ml），待檢樣品OD450nm值＜質(zhì)控陽(yáng)性O(shè)D450nm值，則認(rèn)為待檢樣品血清抗體未達(dá)到保護(hù)水平（0.5IU/ml）。
注意事項(xiàng)
(1) 本試劑盒僅用于檢測(cè)犬血清中狂犬病毒IgG抗體。
(2) 不要使用過(guò)了有效期的試劑，不同批次試劑盒的成分不要混用。
(3) 所有試劑2～8℃儲(chǔ)存，使用前所有的試劑需平衡至室溫。
(4) 所有的試劑避免接觸皮膚和眼睛，如果碰到，立即用冷水沖洗接觸處。
(5) 在樣品采集，儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中避免污染。
(6) 避免溶液被金屬離子、氧化劑和清潔劑污染，每個(gè)容器一定要清潔，對(duì)酶標(biāo)記物和底物不要使用同一個(gè)容器和吸頭。
(7) 檢測(cè)樣品預(yù)先進(jìn)行熱滅活（56℃、30min），建議樣品在-20℃條件下保存。操作過(guò)程中的移液、時(shí)間和洗滌都必須精確控制。
(8) 試劑盒開封后未用完的試劑盒，質(zhì)控陰性和陽(yáng)性血清應(yīng)-20℃以下凍存，其余試劑應(yīng)2～8℃保存，ELISA板條密封條件下2～8℃保存，可于1個(gè)月內(nèi)用完。
規(guī)格
96孔/盒
貯藏與有效期
2~8℃保存，有效期為12個(gè)月。
批準(zhǔn)文號(hào)
獸藥生字031418122
